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進(jìn)口蒸發(fā)光散射檢測(cè)器究竟該如何進(jìn)行操作呢?
點(diǎn)擊次數(shù):275 發(fā)布時(shí)間:2025-11-20
進(jìn)口蒸發(fā)光散射檢測(cè)器是一種基于光散射原理的通用型檢測(cè)裝置,廣泛應(yīng)用于高效液相色譜(HPLC)、超高效液相色譜(UHPLC)及毛細(xì)管電泳(CE)等分離分析領(lǐng)域。其核心優(yōu)勢(shì)在于擺脫了傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)對(duì)樣品光學(xué)特性的依賴(lài),能夠檢測(cè)無(wú)紫外吸收、無(wú)熒光或電活性的物質(zhì),如糖類(lèi)、脂類(lèi)、表面活性劑、氨基酸、藥物及聚合物等。
工作原理:ELSD的檢測(cè)過(guò)程分為霧化、蒸發(fā)和光散射檢測(cè)三個(gè)關(guān)鍵步驟。色譜柱流出的液體樣品進(jìn)入霧化器,與高速惰性氣體(如氮?dú)猓┗旌闲纬晌⑿∫旱危纬蓺馊苣z。氣溶膠進(jìn)入加熱的漂移管,液滴中的溶劑迅速蒸發(fā),僅留下樣品微粒。這些微粒通過(guò)光束(如激光或LED光源)時(shí)產(chǎn)生光散射,散射光強(qiáng)度與樣品濃度成正比。光電傳感器采集散射光并轉(zhuǎn)化為電信號(hào),最終輸出色譜圖。
進(jìn)口蒸發(fā)光散射檢測(cè)器的操作步驟:
1、開(kāi)機(jī)前檢查
配制流動(dòng)相:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,準(zhǔn)確配制所需的流動(dòng)相,確保其純度和成分符合分析要求。
連接管路:將色譜柱出口管路與檢測(cè)器入口穩(wěn)固連接,防止在運(yùn)行過(guò)程中出現(xiàn)松動(dòng)或泄漏。
檢查氣源:打開(kāi)空氣或氮?dú)庠矗斎雺毫νǔTO(shè)置為350kPa(具體壓力可能因儀器型號(hào)和廠家要求而有所不同,需參照儀器說(shuō)明書(shū)),確保氣體純凈,無(wú)顆粒雜質(zhì),以免影響檢測(cè)結(jié)果和損壞儀器部件。
2、開(kāi)機(jī)與初始化
開(kāi)啟儀器電源:打開(kāi)檢測(cè)器后面板上的電源開(kāi)關(guān),儀器開(kāi)始自檢,操作窗口顯示儀器處于“待機(jī)狀態(tài)”,并顯示計(jì)時(shí)器時(shí)間,同時(shí)自動(dòng)顯示上一次運(yùn)行關(guān)機(jī)前最后所采用的方法設(shè)置。
排氣與輸送流動(dòng)相:對(duì)所需流動(dòng)相進(jìn)行排氣操作,排除管路中的氣泡,然后開(kāi)啟泵輸送流動(dòng)相。確保儀器前方玻璃管中的虹吸管充滿(mǎn)液體,霧化管中液滴正常。
沖洗平衡流動(dòng)相:設(shè)置合適的Gain值(增益值,用于放大信號(hào),根據(jù)實(shí)際峰型調(diào)整,過(guò)大可能導(dǎo)致平頂f)、漂移管溫度(根據(jù)流動(dòng)相和被測(cè)物質(zhì)的性質(zhì)選擇,通常使用低沸點(diǎn)溶劑作為流動(dòng)相,漂移管溫度最大設(shè)定值一般為80℃,維護(hù)清洗時(shí)可設(shè)置為最大100℃),打開(kāi)LED燈,開(kāi)始沖洗平衡流動(dòng)相。
調(diào)零與基線(xiàn)穩(wěn)定:沖洗完成后,確保基線(xiàn)壓力穩(wěn)定,進(jìn)行調(diào)零操作,使儀器輸出信號(hào)歸零,為后續(xù)樣品檢測(cè)提供準(zhǔn)確的基準(zhǔn)。
3、參數(shù)設(shè)置
根據(jù)樣品和分析要求:通過(guò)操作面板或軟件界面,設(shè)置霧化氣體流量、流動(dòng)相流速、漂移管溫度、撞擊器位置等關(guān)鍵參數(shù)。例如,霧化氣體流量決定霧化時(shí)形成的液滴大小,氣體流量越高形成的液滴越小,但小顆粒散射光少,信號(hào)較小,需通過(guò)實(shí)驗(yàn)決定產(chǎn)生最佳信號(hào)噪音比的氣體流量;撞擊器位置的選擇取決于流動(dòng)相的組成、流速和被分析物的揮發(fā)性,關(guān)鍵是在靈敏度和流動(dòng)相的充分揮發(fā)之間取得適當(dāng)平衡。
4、樣品分析
進(jìn)樣測(cè)試:將處理好的樣品通過(guò)自動(dòng)進(jìn)樣器或手動(dòng)進(jìn)樣方式注入色譜系統(tǒng),樣品被輸送到色譜柱中進(jìn)行分離,分離后的組分依次進(jìn)入蒸發(fā)光散射檢測(cè)器。
數(shù)據(jù)記錄與分析:檢測(cè)器對(duì)樣品組分進(jìn)行檢測(cè),產(chǎn)生對(duì)應(yīng)的信號(hào)強(qiáng)度變化,這些數(shù)據(jù)被記錄下來(lái)。通過(guò)配套的軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析,如積分、校正等操作,獲取樣品的定量和定性信息。
5、關(guān)機(jī)與清理
沖洗管路與霧化器:測(cè)試完成后,用適當(dāng)?shù)娜軇_洗管路與霧化器30分鐘以上,以清除殘留的樣品和雜質(zhì),防止堵塞和腐蝕。
停止泵送液:沖洗完成后,停止泵送液,等待一段時(shí)間(建議30分鐘以上),讓管路中的液體充分排出。
關(guān)閉氣源與電源:先關(guān)閉氣源,再關(guān)閉檢測(cè)器的主電源。同時(shí),檢查廢液瓶和冷凝瓶,及時(shí)倒掉過(guò)量的液體,防止液體溢出污染環(huán)境或損壞儀器。

